RACE

RACE

价格: ¥1000

产品详情

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提供商 :北京亿鸣复兴生物科技有限公司

服务名称 :RACE

规格 :详询

★服务描述:
RACE(rapid-amplification ofcDNA ends,RACE) 即 cDNA 末端快速扩增技术,是基于PCR 技术基础上由已知的一段 cDNA 片段,通过向两端延伸扩增从而获得完整 cDNA 5'3' 末端的有效方法,无需构建 cDNA 文库,即可在短时间内获得目的基因 cDNA 序列,具有简单、快速、廉价等优势,在 cDNA 文库的构建及筛选,新基因的发现等方面得到了广泛的应用。


★服务内容:
RNA 提取、定量及反转录
RACE(3'和 5'-RACE)
结果分析及实验报告


★服务流程:
1、3'-RACE 的技术
利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的 Oligo(dT)30MN 作为引物反转录mRNA,形成 cDNA 链,然后以 cDNA 为模板,基因特异引物 GSP1(gene specific primer,GSP)作为上游引物,含有部分接头序列的通用引物 UPM(universal primer,UPM)作为下游引物,PCR 扩增目的基因的 3' 末端。

2、5'-RACE 的技术
利用连有 SMART 寡核营酸序列通用接头引物的 Oligo(dT)30MN 作为引物和反转录酶MMLV 反转录 mRNA,形成 cDNA。反转录时,利用该反转录酶具有的末端转移酶活性,在cDNA 5'末端自动加上 3-5 个(dC)残基,退火时(dC)残基与含有寡核苷酸序列 Oligo(dG)的通用接头引物配对,进而转换为以 SMART 序列为模板继续延伸而连上通用接头.最后以含有部分接头序列的通用引物 UPM(universal primer,UPM)作为上游引物,目的基因特异引物 2(GSP 2 genespecific primer,GSP)作为下游引物, SMART 第一链 cDNA 为模板,PCR 扩增目的基因的 5'末端。


★需要提供的信息:
(1)您可以选择提供样品组织材料,或是材料的总RNA:但必须保证您提供的实验材料新鲜,请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂;您提供的总RNA必须无降解,无基因组DNA污染,OD260/OD280在1.8-2.0之间。
(2)3'RACE实验要求总RNA量大于10 mg,5' RACE实验要求总RNA量大于15 mg。如果基因的丰度较低或者未知序列较长,根据具体实验的情况增加实验材料的量。
(3)已知的参考序列长度≥150 bp。我们将对已知序列进行验证,如果验证结果与您提供的序列完全不符,我们将停止实验并收取实验成本费用。如果验证结果与您提供的序列有个别碱基不符,我们在征求您的意见后决定是否进行RACE实验。



★服务周期:
4-5周(20-25个工作日)


★服务说明:
客户必须保证所提供的文献材料的准确性,如果是因客户自己的原因造成实验的失败,后果由客户承担。


★服务承诺:
扩增片段的电泳图,含 3'5'-RACE PCR 片段的质粒载体细菌一份;
全长 cDNA 序列及测序报告;
RACE 实验步骤、使用仪器、引物序列等。


★其他服务项目:



★项目一般流程:


 

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