甲基化检测（BSP、MSP等）

提供商 ：北京亿鸣复兴生物科技有限公司

服务名称 ：甲基化检测（BSP、MSP等）

规格 ：详询

★服务描述：
DNA 甲基化是最早发现的基因表观修饰方式之一，真核生物中的甲基化仅发生于胞嘧啶，即在 DNA 甲基化转移酶（DNMTs）的作用下使 CpG 二核苷酸5’-端的胞嘧啶转变为 5’-甲基胞嘧啶。DNA 甲基化通常抑制基因表达，去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。检测甲基化的方法有 3 中：

1. 甲基化特异性的 PCR（M ethylation-specific PCR，MSP）

用亚硫酸氢盐处理基因组 DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变；随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行
PCR。通过电泳检测 MSP 扩增产物，如果用针对处理后甲基化 DNA 链的引物能得到扩增片段，则说明该位点存在甲基化；反之，说明被检测的位点不存在甲基化。

1. 亚硫酸氢盐测序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）

用亚硫酸氢盐处理基因组 DNA，则未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶， 而甲基化的胞嘧啶不变。随后设计 BSP 引物进行 PCR，在扩增过程中尿嘧啶全部转化为胸腺嘧啶，最后对 PCR 产物进行测序就可以判断 CpG 位点是否发生甲基化称为 BSP-直接测序方法。将 PCR 产物克隆至载体后进行测序，可以提高测序成功率，这种方法称为 BSP-克隆测序法。

1. 高分辨率熔解曲线法（High Resolution Melting，HRM）

在非 CpG 岛位置设计一对针对亚硫酸氢盐修饰后的 DNA 双链的引物，这对引物中间的片段包含感兴趣的 CpG 岛。若这些 CpG 岛发生了甲基化，用亚硫酸氢盐处理后，未甲基化的胞嘧啶经 PCR 扩增后转变成胸腺嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变，样品中的 GC 含量发生改变，从而导致熔解温度的变化。


★服务内容：

1. DNA 提取；
2. 亚硫酸盐处理；
3. PCR 反应；
4. PCR 挖胶回收；
5. 克隆；
6. 测序。

★结果展示：



★需要提供的信息：

1. 样本，可以为细胞、组织、血液、血清等样品材料，也可给基因组 DNA。
2. 序列信息，引物信息，若是用 HRM-Real TimePCR 方法，客户需提供标准品。

★服务周期：
一般 30 个工作日左右，但具体时间因蛋白和结合位点数量而异。


★服务承诺：

1. 本公司会在最短时间内快速将实验完成。
2. 本公司会为您提供详细的实验报告，报告提供的内容完全满足您论文或写文章的需要。
3. 本公司保证检测结果的准确、客观、真实性，但是不能确保一定得到某特定结果。

★其他服务项目：



★项目一般流程：