双萤光素酶报告基因检测裂解组分(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Lysis Component)

库存 ：大量

英文名 ：Dual Luciferase Reporter Gene Assay Lysis Component

CAS号 ：点击查看

保质期 ：有效期1年

供应商 ：翌圣生物科技(上海)股份有限公司

保存条件 ：-20℃保存

规格 ：100T

产品信息

 

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Lysis Component	11406ES60	100 T	139.00
	11406ES76	500 T	387.00

 

产品描述

 

本试剂采用独特的裂解缓冲液体系，可以快速使细胞裂解，释放出萤光素酶。在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，释放出的萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase）能够催化萤光素（luciferin）氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光，该萤光可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示：

图1：萤火虫萤光素酶检测原理图

 

产品组分

 

组分编号	组分名称	产品编号/规格
		11406ES60（100 T）	11406ES76（500 T）
11406-A	细胞裂解液	2×30 mL	10×30 mL

 

运输与保存方式

 

干冰运输。-20℃保存，有效期1年。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

 

 

实验步骤

 

1.细胞

1）将细胞裂解液充分混匀，按如下方式加入细胞裂解液，充分裂解细胞。

a: 对于贴壁细胞，吸尽细胞培养液，按照下表比例加入细胞裂解液，轻轻旋转培养皿或者培养板使裂解液完全覆盖细胞；

b: 对于悬浮细胞，离心弃去上清，按照下表比例加入裂解液。

细胞培养板	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板
裂解液加入量	100 μL	150 μL	200 μL	300 μL	μL

2）冰上孵育5 min，充分裂解细胞。

3）用于荧光检测或保存。

【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。

2.叶片组织（以烟草叶片为例，仅供参考）

1）取3-4片直径为6-8 mm的处理好的烟草叶盘，放入2 mL的 EP 管（提前放入3-4个小钢珠）中，液氮中冷冻，使用破碎仪进行研磨破碎（45 Hz，30 s）。破碎完全后在EP管中加入100 μL裂解液。

8）冰上孵育5 min左右，充分裂解叶片。

9）10000-16000 rpm离心1 min，取上清进行荧光检测或保存。

【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。

3.原生质体（仅供参考）

1）将重悬后的原生质体离心收集至2 mL离心管中，加入100 μL左右的裂解液。

2）冰上孵育5 min左右，充分裂解原生质体。

3）用于荧光检测或保存。

【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。

 

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