实验方法

地塞米松对蛋清诱发大鼠足跖肿的影响实验

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本实验通过测定大鼠踝关节肿胀程度,观察炎症的发生及地塞米松的抗炎作用。实验旨在观察地塞米松、吲哚美辛对致炎物质所致大鼠后肢足跖肿的抗炎作用,了解实验性炎症模型的建立。

周长法

实验原理

异体蛋白进入机体后可在短时间内引起组织的急性炎症反应,发生炎症的部位明显肿胀、体积增大。肾上腺皮质激素可通过多种方式明显抑制各种致炎因素引起的炎症,从而改善红、肿、热、痛等症状。本实验通过测定大鼠踝关节肿胀程度,观察炎症的发生及地塞米松的抗炎作用。

实验材料

大鼠

实验步骤

一、周长或测量法

⒈  取禁食过夜、体重相近的雄性大鼠3只,称重并分别以不同记号标记甲鼠、乙鼠、丙鼠,每只大鼠生理盐水5 ml灌胃,以保证大鼠体内水分相同。

⒉  甲鼠腹腔注射0.5%地塞米松磷酸钠注射液5 mg/Kg(0.5%溶液1 ml/Kg)、乙鼠灌胃给予1%吲哚美辛混悬液10 mg/Kg(1%混悬溶液1 ml/Kg)、丙鼠腹腔注射生理盐水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝关节处用沾有油漆的丝线作一圆周形标记,再用丝线绕标记测量周长或厚度千分尺测量厚度两次。30 分钟后,在大鼠左或右后足掌腱膜下向踝关节周围用5 号针头注入新鲜鸡蛋清0.1ml,以后每隔10 分钟测量大鼠左或右后踝周长或厚度,连测6次,用致肿前后左后踝周长厚度之差,作为踝关节肿胀程度。

二、容积法

⒈  取禁食过夜、体重相近的雄性大鼠3只,称重并分别以不同记号标记甲鼠、乙鼠、丙鼠,每只大鼠生理盐水5 ml灌胃,以保证大鼠体内水分相同。

⒉  甲鼠腹腔注射0.5%地塞米松磷酸钠注射液5 mg/Kg(0.5%溶液1 ml/Kg)、乙鼠灌胃给予1%吲哚美辛混悬液10 mg/Kg(1%混悬溶液1ml/Kg)、丙鼠腹腔注射生理盐水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝关节处用沾有油漆的丝线作一圆周形标记,以排水法测量大鼠左后足之正常容积(以ml 表示)。30 分钟后,在大鼠左后足掌腱膜下向踝关节周围注入新鲜鸡蛋清0.1 ml,以后每隔10 分钟测量大鼠左后踝容积,连测6 次,用致肿前后左后踝容积之差,作为踝关节肿胀程度。
 
⒊  排水法操作步骤:

⑴转动三通活塞D,使 A与B相通。将水推到吸管“O”处,接着关闭B,使A 与C相通。

⑵注射器的水推完,使玻管C 内液面与其刻度圈平齐(玻管C 内水量多少可用滴管直接调节)。

⑶每次测量位置相同,可用记号笔或黑漆在实验大鼠左后踝关节划一标记,然后将左后肢拉直置入玻管C内,抽动注射器针芯,使左后肢标记处与玻管C上的刻度相平。待玻管C内液面与其刻度相平时,立即关闭C,使A与B相通,随即取出大鼠后肢。

⑷将注射器内剩余液体全部推入吸管B,记录水柱高度。此时吸管B 内显示的水柱高度即代表所测踝关节肿胀程度的容积。

三、结果
 

将实验室各组实验结果算出平均值,以横坐标表示时间(分),纵坐标表示关节肿胀周长或容积,绘制成坐标图。

注意事项

⒈  周长或厚度测量法:测量周长的软皮尺不能有弹性,刻度以0.2 mm左右为宜,测量部位尽量少移动,每次测量的宽紧度必须一致。测量动作要熟练,要由专人负责,尽量减少误差。注射致炎剂时,实验者应将动物后肢拉直,先自跖中部皮下向上注入一部分,然后掉转针头向下注完。

⒉  容积法:在每一次测量之前,都要调节C和B的零点,若因大鼠肢体带走部分水分,则必须把水补充到玻管C的刻度处,再按上述顺序测量。

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