1.  进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液，将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一份重悬于50 μl 含CNBr 的70%甲酸中，室温下反应。

2.  在0、8、24及48 h 的时刻，各取5 μl 并冻干。

 

3.  往所有冻干样本加20 μl 1×SDS样品缓冲液，煮沸10 min，加样于SDS-聚丙烯酰胺凝胶。

 

4.  分析凝胶电泳结果以确定完全裂解蛋白所需的最短温育反应时间。