基本方案
实验原理
1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中切片技术（组织学基本技术）">冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。
2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。
2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。
3. 保证CryoKwik 呈液状（必要的话，通过接触一热的金属棒使其熔化），将样品浸于冷的CryoKwik 中1 min。
4. 置带样品的滤纸条于冰冻切片仪的样品槽中，并固定在有一薄层OCT化合物的切片托盘上。
图一、切片程序
5. 将冰冻切片仪中的样品切片托盘放入预冷的加热槽中或CO2喷射型冰冻器中冰冻，直至OCT化合物凝结，并在冰冻切片仪中放置10 min 以上，使温度均衡。
6. 用一预冷的剃须切片，将样品块修成梯形（在不会影响样品形态情况下），撕去滤纸。
7. 将切片卡盘安于切片机上，使梯形的平行面与刀相齐并将宽面面向刀的边缘，向后移动样品块使其恰好可切过刀边。
8. 用刀快切，在样品块上修整出“光面”（每秒切出一张切片’厚约5~10 μm）。待已切至组织样品，从切面上可看到所要切的组织结构或样品块大小理想时（一边在0.5~1 cm之间），便可收集切片，按步骤9进行切片的收集（滚板法）。
9. 图二所示为最常用的塑料滚板法，它很容易进行连续切片，伹对大的组织切面则不太适合（较大组织切片的收集见滚条法）。
（1）进行切片前，放下滚板使其接触切片刀并置放在与刀边缘平行位，从刀口稍向后移。
（2）扭动转轴并切片，在此情况下切片将到达刀的边缘处并停住。
（3）升起滚板，用一小毛刷，将切好的切片从切口处扫下来，降下滚板，并稍微向前推移。
（4）小重复步骤（1）~（3）直至切片平稳地滑过滚板与刀间（通常滚板在刀口前方约 0.5 mm，然后进行下一步）。
图二、塑料滚板
10. 升起滚板，将切好的切片用一细毛刷移至刀背面，用一预先写好标签，温热的以明胶或多聚赖氨酸包被的载玻片，轻触并载起切片。
11. 切片承于载玻片上后，用密毛刷（1/4英寸即6.35 mm）清理刀上聚集的碎冰。
12. 用毛刷清理刀时，需相当用力，而且应顺着刀口，否则切片刀会很快变钝或拫坏毛刷。
实验材料
实验步骤
1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。
2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。
2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。
3. 保证CryoKwik 呈液状（必要的话，通过接触一热的金属棒使其熔化），将样品浸于冷的CryoKwik 中1 min。
4. 置带样品的滤纸条于冰冻切片仪的样品槽中，并固定在有一薄层OCT化合物的切片托盘上。
图一、切片程序
5. 将冰冻切片仪中的样品切片托盘放入预冷的加热槽中或CO2喷射型冰冻器中冰冻，直至OCT化合物凝结，并在冰冻切片仪中放置10 min 以上，使温度均衡。
6. 用一预冷的剃须切片，将样品块修成梯形（在不会影响样品形态情况下），撕去滤纸。
7. 将切片卡盘安于切片机上，使梯形的平行面与刀相齐并将宽面面向刀的边缘，向后移动样品块使其恰好可切过刀边。
8. 用刀快切，在样品块上修整出“光面”（每秒切出一张切片’厚约5~10 μm）。待已切至组织样品，从切面上可看到所要切的组织结构或样品块大小理想时（一边在0.5~1 cm之间），便可收集切片，按步骤9进行切片的收集（滚板法）。
9. 图二所示为最常用的塑料滚板法，它很容易进行连续切片，伹对大的组织切面则不太适合（较大组织切片的收集见滚条法）。
（1）进行切片前，放下滚板使其接触切片刀并置放在与刀边缘平行位，从刀口稍向后移。
（2）扭动转轴并切片，在此情况下切片将到达刀的边缘处并停住。
（3）升起滚板，用一小毛刷，将切好的切片从切口处扫下来，降下滚板，并稍微向前推移。
（4）小重复步骤（1）~（3）直至切片平稳地滑过滚板与刀间（通常滚板在刀口前方约 0.5 mm，然后进行下一步）。
图二、塑料滚板
10. 升起滚板，将切好的切片用一细毛刷移至刀背面，用一预先写好标签，温热的以明胶或多聚赖氨酸包被的载玻片，轻触并载起切片。
11. 切片承于载玻片上后，用密毛刷（1/4英寸即6.35 mm）清理刀上聚集的碎冰。
12. 用毛刷清理刀时，需相当用力，而且应顺着刀口，否则切片刀会很快变钝或拫坏毛刷。
