建议分析步骤

1. 实验前，将实验中所需的各种试剂及仪器准备好；

2. 按说明配好实验中所需的试剂，衍生缓冲溶液和平衡缓冲溶液；

3. 进行衍生化实验；

4. 配制流动相，开动仪器，用梯度的开始比例平衡系统30min；

5. 用衍生好的样品进行分析，处理结果，得出报告。

实验注意事项

1. 流动相B的配制要注意pH的大小，pH的大小将影响分离的情况。

2. 流动相B不能长时间保存，易变，应现用现配。

3. 衍生过程应注意避光，因为衍生物对光敏感所以在操作的过程中用棕色的量瓶进行衍生及样品的保存。

4. 应注意色谱柱的保养，以延长其使用时间。换柱子时可能会出现分离情况改变的情况，应针对不同的情况，调整梯度曲线，使分离达到要求。

5. 衍生化试剂有剧毒，实验中应注意防护。衍生化试剂，2，4-二硝基氟苯的乙腈溶液，Sanger's试剂，用来标记末端氨基酸群，也用于检测苯酚，抑止神经系统动作电位，引起接触性高紧张感。可能导致癌症。