实验方法

流式细胞术应用 | 小鼠脾细胞表型分析简便操作

2017-04-12 15:26

实验简介

脾脏是机体最大的免疫器官,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心,ft 机体免疫失衡时,免疫细胞的数量和比例都会发生变化,流式细胞仪能够直接检测出该变化的发生。

该实验通过一个优化设计的 8 色方案,检测出了小鼠脾脏中 T、B 细胞亚群以及 FOXp3 的表达,从图中可以看出细胞分群好, 结果的判读准确,操作简便,证明 CytoFLEX 卓越的性能和便捷的操作性。

材料与方法

▶ 试剂

▶ 样品制备

Sample Type c57bl/6 小鼠脾脏细胞
Species 小鼠
Age of specimen 6 周
Prep Method

1. 小鼠经劲椎脱臼,取出脾脏,放于 5 mL 的 PBS+1%FBS+2 mMEDTA 溶液中;

2. 研磨脾脏,经过过滤,得到脾脏细胞;

3. 裂解红细胞,计数细胞,调整到 1x106 cells/mL;

4. 按照抗体说明书加抗体,染色,上机检测。


数据分析

1.该实验比较简单,设门时圈中目的细胞,同时准确调节补偿,即可成功;

2.对于裂红这个步骤,需要裂解完全,不然会对结果分析带来干扰。

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