实验方法

LB培养基的配制

2013-08-23 16:01

LB培养基,是微生物学实验中最常用的培养基,用于培养大肠杆菌等细菌,其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。


尽管该培养基的名称被广泛解释为Luria-Bertani 培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语的 lysogeny broth,即溶菌肉汤。


LB培养基的配制:


成分


胰蛋白胨(tryptone)
10g


酵母提取物(yeast extract)
5g


氯化钠(NaCl)
10g


固体培养基另加 琼脂粉 15-20g


加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121℃灭菌30min


配制方法


  (1)称量 分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。


  (2)溶化 加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中,用玻棒搅拌,使药品全部溶化。


  (3)调pH 用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。


  (4)定容 将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。


  (5)加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。


  (6)分装、加塞、包扎。


  (7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。


(责任编辑:大汉昆仑王)

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来源:互联网

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