免疫组化, FISH, CGH, LOH, MSI, 克隆性重排等的应用范围及应用”盲点”。
请教各位高手，这个题目怎么回答？马上就要考试啦，答不出来，太难了！！谢谢

同问啊~~~

大家都是校友……

免疫组化的应用范围

答：

（1）提高病理诊断准确性

（2）对疾病的预后和治疗的意义

（3）癌基因蛋白的应用

（4）对肿瘤增生程度的评价 ki67 PCNA

（5）微小病灶的发现 微小癌 微小病灶（如羊水栓塞）

（6）在肿瘤分期上的意义

（7）指导肿瘤治疗

（8）免疫性疾病的辅助诊断

（9）病原微生物的检测

应用“盲点”：由于抗体稀释度、多克隆抗体特异性问题、试剂盒选择、操作中时间温度染色过程等因素使其在结果判断上存在“假阳性”和“假阴性”；影响因素很多，使结果判断的标准化问题尚难统一；存在抗原抗体交叉反应、抗原联合表达等问题。

B CGH：比较基因组杂交，一种分子细胞遗传学技术，通过单一的一次杂交可对某一肿瘤整个基因组的染色体拷贝数量的变化进行检查。在染色体数目异常、染色体复杂结构异常及标记染色体来源判定等方面均具有明显的诊断优势，

应用：实体瘤；血液系统恶性疾病；遗传性疾病的辅助核型分析、诊断预后判断和发病机制研究；胚胎发育方面，可用于产前诊断；探索新的肿瘤相关基因及遗传综合征等领域。

盲点： CGH技术所能检测到的最小的DNA扩增或丢失是在3-5Mb,故对于低水平的DNA扩增和小片段的丢失会漏检。此外在相差染色体的拷贝数量无变化时，CGH技术不能检测出平等染色体的易位（就是姐妹染色单体同源序列的互换）。图像分析系统昂贵。其对检测原癌基因扩增较为灵敏，但对检测基因缺失敏感性则相对较弱。

C LOH 杂合性缺失：一个位点上两个多态性的等位基因中的一个出现缺失。杂合性缺失在肿瘤细胞中是一种非常常见的DNA变异。抑癌基因的杂合性缺失会导致肿瘤的发生。

盲点：利用LOH的微卫星标记法无法准确定位纯合缺失区域及存在假阳性等问题。

D MSI 微卫星DNA不稳定性：一个位点上两个多态性的等位基因条带增多和大小发生改变。

应用：可以反映肿瘤中错配修复系统失活后细胞分裂的次数；在衰老机制研究中用于研究老年病；鉴定个体特异性。

盲区：微卫星技术引物的获得较为繁琐，需要构建基因组文库、筛选阳性克隆、DNA测序等一系列工作，费用高，耗时长。而且该方法基于基因间只存在重复单位数目的差异的假设，不能真实地反映出微卫星位点在全部DNA序列上的变异。在扩增过程中，会产生误差，引起结果错误。

E 克隆性重排检测

应用：检测肿瘤细胞的克隆性存在，以判断恶性肿瘤；临床上IgH和TCR基因单克隆检测在淋巴瘤的分子诊断中普遍应用。作为淋巴细胞源性肿瘤的分子生物学标记，是淋巴瘤早期诊断和疗效评价的基本方法。

盲点：主要应用与淋巴细胞源性肿瘤的检测，其它应用尚少，存在假阳性。

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