实验方法

【转贴】教您几招,如何鉴别假冒伪劣ELISA试剂盒

2015-07-15 10:24

近来许多客户向我们反映一些唯利是图的公司和小作坊,用假冒伪劣的ELISA试剂盒坑害广大的科研工作者,他们往往唯利是图,无视科学研究的严谨性和严肃性,让广大的科研工作者被动造假,严重扰乱了科研工作,严重扰乱了市场秩序,所以我们有义务。

有责任揭露这些作伪造假者制作假冒伪劣ELISA试剂盒的手法,同时提供如何鉴别这些假冒伪劣ELISA试剂盒的方法,供广大的科研工作者和用户参考,让那些挂羊头卖狗肉,冒牌进口试剂,以及全无诚信,作假造伪者,如过街之鼠,人人喊打。

造假一:在国外注册公司,国内生产,隐瞒生产产地,明明是国产试剂却宣称国外进口虚报高价,欺骗广大用户。

鉴别方法:将“厂家名”、“ELISA”和“假货”关键词在google上搜索,各类论坛的用户会将该ELISA试剂盒的质量和效果,是否伪劣一一有所讨论。

造假二:仿冒进口ELISA试剂盒,使得进口分装ELISA质量参差不齐,鱼龙混杂,很多都是经小作坊粗劣加工而成,这样的试剂盒偶尔可以侥幸做出结果,如果做不出来,所购买的公司又没有完善的售后服务,往往对客户的问题推三阻四,推脱责任,最后还是消费者吃亏。

鉴别方法:直接打电话给生产厂商,询问他们试剂盒抗原和抗体的来源,索要试剂盒说明书,然后利用网络确认这些信息,正规的ELISA生产商,这些信息都是非常齐全,如果信息不全,则该ELISA的制造水平和质量都会很差。

造假三:某些奸商为了夸大其生产ELISA涵盖的指标的范围,用一种指标来冒充其它指标,造成各种种属、各种指标都可以做的假象。比如用TGFβ这样的指标代替大多数试剂盒的其他指标作为检测抗体,同样可以获得良好的标准曲线。

因为TGFβ在大多数哺乳类动物中(人、大鼠、小鼠、猪、牛……)都有广泛表达,种属间抗原的氨基酸序列同源性达100%,TGFβ随着其他因子的影响,其表达水平也会发生相应的变化,一般客户很难察觉,因此这样的恶性造假行为使得消费者被动造假,后果极其严重,因此善意提醒客户警惕此类作假试剂盒!

鉴别方法:

Ⅰ. 利用干扰实验即可辨别ELISA试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:

(1)将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液。

(2)37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体。

(3)后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。

(4)实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。

(5)如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。

Ⅱ.如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可辨别ELISA试剂盒是否造假,方法如下:

(1) 取出购买的试剂盒A的包被板两条。

(2) 一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。

(3) 另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。

(4) 后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。

(5) 实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。

(6) 如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。

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来源:丁香园论坛

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