实验方法

【求助】PEI转染问题

2015-09-01 17:47

我用PEI(sigma 25kDa)作为转染试剂,但是发现,同样的细胞,同样的N/P 条件下。转染效果一次比一次要差,难道是PEI容易在水性条件下降解?

我们的这个PEI买的时间比较久了,不知道是不是该买新的了。

一直找不出原因,很是郁闷,请大虾帮忙解答,
PEI粉末放置久了后,是会出现转染效率变差的状况的。另外不知道你的PEI用做转染前有进行加热处理吗?PEI在4度或者-20中放置一段时间后会出现一些沉淀的,需要加热使之完全溶解的。

btw,你要转染的是什么细胞啊?方便说吗?
重新买吧,放3个月以上的粉末基本作用就很差了
您好,我也是用的 PEI(sigma 25kDa)的,就是average Mw ~25,000 by LS, average Mn ~10,000 by GPC, branched,想问下你是怎么算氮磷比的呀,它1毫升里面有多少摩尔的氮?非常感谢!!!!
先用LIP2000转试试看,如果lip转染也进不去的话,就不是你样品的问题了
我们通常用热的PBS配制PEI,然后置-80度保存,使用前60度水浴直到溶液澄清,用后置于4度,在4度放置不能超过一个月,并且期间禁止再次冰冻。有时PEI转染导致细胞毒性,需要在转染后4-6小时更换培养基。
请问在SIGMA定的PEI的货号是多少呢?
bigbang_0_0 wrote:
我们通常用热的PBS配制PEI,然后置-80度保存,使用前60度水浴直到溶液澄清,用后置于4度,在4度放置不能超过一个月,并且期间禁止再次冰冻。有时PEI转染导致细胞毒性,需要在转染后4-6小时更换培养基。
不会吧,PEI转染是不需要换液的
@小月叶子 不是吧,293t如果不换液会死的
额, 可能配方不同吧,呵呵~ 我们只需要补液不用换液的
ym一抹 wrote:
@小月叶子 不是吧,293t如果不换液会死的

我也不换液,293ft 48小时不会死。

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