实验方法

【求助】请教蛋白质相互作用or受体配体作用

2015-09-09 16:57

请问各位高人,如果ip证实A蛋白与B蛋白有相互作用,如何研判两者的作用是受体配体的作用还是一般的蛋白相互作用?
谢谢!
我倾向于不要把 蛋白质之间属于受体配体结合还是其他相互作用区分得如此严密。

受体配体原指胞外信号分子(主要是化学小分子)与膜受体之间的相互作用。其特点是特异性,高亲和力,饱和性,可逆性,引发生理反应,比如G蛋白。(胞内受体配体也是同样的,比如核受体)

从这几点出发,要区分两(多)个蛋白质属于受体配体结合还是其他相互作用有困难。蛋白质之间相互作用必然也包括以上特点。下列是研究蛋白质相互作用的主要方法,这些方法无不是利用相互作用的蛋白质之间具有特异性,高亲和力,饱和性,可逆性。这些方法的目的是干什么? 那还用说,当然是研究蛋白质相互作用以后,引发了什么样的生理变化。

一、酵母双杂交系统

二、噬茵体展示技术

三、等离子共振技术

四、荧光能量转移技术

五、抗体与蛋白质阵列技术

六、免疫共沉淀技术

七、pull-down技术

=====================================

后来又想,楼主问的还是有道理的,比如,转录酶复合体,核糖体,proteasome,核膜通道,这些巨大的蛋白质复合体的确不是受体配体这么简单,它既具有受体配体结合的特点(特异性,高亲和力,饱和性,可逆性,引发生理反应),又具有其他的特点,比如可调控,功能更多样。

也许最佳的方法就是研究蛋白质结合以后的功能变化。避开受体配体这个概念上的界限。

泛素通路(ubiquitin pathway),貌似就没有人会去讨论这中间谁是谁的受体,谁是谁的配体。但是其整个通路是由一系列的蛋白质来承担各项功能的。

===================

...........等砖头。
问了这个问题后,就开始忙着毕业了,本想答辩时候有人会问这个问题,最终也没有问到。
开始工作,开始新的忙碌,好久没来这片纯净的园子了,不想gingivalis战友早已经做了这么精彩的回答。
是的,我说的就是一些复合体的问题,到底是受体配体,还是其他,至今不知道。
非常感谢楼上的回答!
学习了,很不错!
并不是所有的蛋白都可以叫做受体啊,如果其中一个蛋白是受体蛋白(如NR,GPCR),就可以通过研究function或者binding做判断,如果都不是受体蛋白,就谈不上受体配体作用了。
个人感觉pull-down技术不是很成熟!

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

扫码关注「实验菌」,入科研社群,领学习资源

更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!

查看全部

来源:丁香园论坛

扫码关注「实验菌」,入科研社群,领学习资源

更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!

知道了