Fura-2 AM 可以测细胞内钙离子浓度，请教各位高人，是什么机理？

分离线粒体出来后，可以用这个染料测钙离子浓度吗？

Fura-2 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM的荧光比较弱，最大激发波长为369nm，最大发射波长为478nm，并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2，从而被滞留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合，结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光，而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度，可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗漏，细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2和钙离子结合后，最大激发波长为335nm(最大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同)，最大发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm，发射波长为510nm。如果做双波长检测，则推荐使用的激发波长为340nm和380nm。Fura-2的激发光谱参考下图，不同曲线表示不同钙离子浓度时的激发光谱。

多谢。
看来在线粒体内不能用啊……