实验方法

【求助】sigma公司的PMA储存液浓度

2015-09-11 17:57

请问大家用sigma公司的PMA时,储存液的浓度是配多少的?保存期多长?我是准备用DMSO配,我看说明书的意思是储存液浓度为20mM,但我工作液的浓度只要100nM,故很难分装和稀释。如果储存液浓度低一点,会不会对保存时间产生影响啊?我在园子里搜过,有用1mg/ml的,但我不知他是否用sigma公司的。
自己顶一下
对于保存而言当然是浓度越高越好,稀释1万倍也是很正常的,小量分装也未尝不可。
谢谢!
我们实验室的做法是买1mg的PMA直接加入1mlDMSO作为母液,只要你不反复冻融关系不大
我们隔壁还有用10Ug/ml做储备液的呢
7258555 wrote:
我们实验室的做法是买1mg的PMA直接加入1mlDMSO作为母液,只要你不反复冻融关系不大

那你们一般保存多久啊?
请问你们用DMSO溶解PMA的时候怎么除菌呢?
是把DMSO用有机系的滤膜过滤后用来溶解PMA,然后直接分装保存呢
还是溶解后仍然需要过滤除菌再分装啊?
DMSO一般都是无菌的吧?!溶解后过滤除菌吧!
一般-20度保存半年应该没问题
DMSO是无菌的啊
关于PMA溶解分装的帖子好多,据我所知的包括园里和文献,有以下需要解决的问题:
1:PMA作为一种PKC激动剂,常用于THP-1或者U937细胞的诱导为巨噬细胞。分子量616.8
2:一般是买sigma的,1mg包装,使用浓度有100nm/L~160nm/L(指上述细胞),那么1mg可处理10L细胞(160nm/L),故一般买1mg包装就足够了. 那么是P8139还是P1585呢,园里有人提到了,两种都可用于诱导分化?
3:溶解,可以查说明书.DMSO以及无水乙醇等都可以. A:1mg+1mLDMSO---分装 B:1mg+1mlDMSO,再用1640稀释(如果是1640培养的话,考虑好了,以后要换培基的话可能有影响)至10mL.再分装(在一篇南华大学的文献上看到的) C:其他方法、剂量。。。。
有园友DMSO溶了分装100个1.5mL的EP管,每管10ul.
4:溶解分装之前要过滤么?EP管分装?分多少管?
5:比如每次取一管10ul,用培养基(不加血清的?)稀释至1ml,有10mL培养液的瓶子加100ul即可终浓度160nm/L.之后放4度留用,其余99管-20度可保存半年。
以上是我所知的,大家看了之后指正解答,急急急啊! 买的1mgPMA-P8139还不敢配母液!!!!!!!!!!!!!!!!!
对了 6:sigma主页网上说List Price RMB是1000元, YOUR Price RMB 619.99
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/Lookup.do?N5=All&N3=mode+matchpartialmax&N4=PMA&D7=0&D10=PMA&N1=S_ID&ST=RS&N25=0&F=PR
到底是那个啊 中介代理说是1000, 我还没给钱
chenfengyiguo wrote:
对了 6:sigma主页网上说List Price RMB是1000元, YOUR Price RMB 619.99
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/Lookup.do?N5=All&N3=mode+matchpartialmax&N4=PMA&D7=0&D10=PMA&N1=S_ID&ST=RS&N25=0&F=PR
到底是那个啊 中介代理说是1000, 我还没给钱

YOUR Price是一级代理商给的价格,你找的中介代理肯定不是一级代理商。
我买的P8139,1mg,用2mlDMSO溶解配成母液,用时用1640稀释,分化U937细胞,浓度50~150ng/ml,24、48、72小时,均未见到明显的分化倾向,操作时注意避光,现配现用,不存在反复冻融问题,现在陷入困境,那位朋友做过,请指点一下把,谢谢

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

扫码关注「实验菌」,入科研社群,领学习资源

更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!

查看全部

来源:丁香园论坛

扫码关注「实验菌」,入科研社群,领学习资源

更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!

知道了