实验方法

蛋白印记和SDS-PAGE电泳

2014-01-20 10:05

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① 10×Running Buffer

将144g Glycine、30.2g Tris Base、10g SDS溶解于1L双蒸水中.

使用时稀释10倍

② 1×Transfer Buffer

将3.03g Tris Base、14.4g Glycine溶解于500mL双蒸水中,加入200mL

Methanol,用双蒸水定容至1L

③ 牛奶封闭液

将2.0g牛奶溶解于20mLTBST中(对应于一块膜的量).

④ TBST

NaCl 150mM

Tris·Cl(pH7.6) 20mM

Tween-20 1‰(v/v)

⑤ TBS

NaCl 150mM

Tris·Cl(pH7.6) 20mM

⑥ 溶液A

ⅰ 0.1M Tris·Cl(pH9.0)

将3.026g Tris Base溶解于200mL双蒸水后调pH至9.0,双蒸水定容至250mL.

ⅱ 0.4mM PCA

将4.45mg PCA溶解于4mL 0.1M Tris·Cl(pH9.0)中.

ⅲ 100g/L luminol

将75mg luminol溶解于750uL DMSO 中.

ⅳ 于100mL 0.1M Tris·Cl(pH9.0)中加入4mL 0.4mM PCA和750uL 100g/L luminol.

⑦ 溶液B

于100mL 0.1M Tris·Cl(pH9.0)中加入200uL 30% H2O2.

⑧ 显影液 (商品化,按说明书配制)

⑨ 定影液 (商品化,按说明书配制)

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来源:互联网

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