各位战友，最近我在做磷酸化STAT3的检测，用cell signaling公司的磷酸化检测抗体与总STAT3抗体做WB，实验组（bFGF+EGF）与阳性对照的磷酸化水平是有增加的，但总STAT3在实验组是减少的而在对照组是强表达的，我看别人的文献都是将总STAT3作为阳性内参一样，应该是不变化的啊，为什么我做了好多次都是不均一的啊？实在是搞不明白，请做过这方面的战友帮忙!谢谢！

你的灌注胶和分离胶分布是?
转膜参数是?膜孔径?
样品蛋白还均一化过啊?

你怎么知道stat3表达不会变化呢？

问一下 磷酸化stat3 的检测时间？