高通量破碎组织提取核酸或蛋白质_实验方法

破碎大量样品、低温破碎大量样品、破碎坚硬或韧性较强的样品时，人工手动研磨就成了实验猿的噩梦。当然，也有很多实验猿已经尝试过市面一些研磨机/超声波粉碎机，发现自己那顽固的样品依然无法被完全破碎/破碎过程损坏了目标成分而十分心塞。

特别地，一些尤其坚硬/韧性比较强的样品，或要求维持低温条件进行破碎提取的样品，需要结合液氮进行研磨，如：皮肤、硬骨骼、软骨、血管、结缔组织、种子等；使用普通机械研磨方法，很难既保证研磨破碎效果又保证样品一直处于低温状态，尤其是提取 RNA、酶等对温度敏感的物质时，低温状态的控制显得尤为关键。

以下破碎方法结合了仪器的使用，使高通量或低温破碎样品、提取内容物更便捷。文章最后分享了提取核酸和蛋白质的实验效果图。

注：由于样品的具体差异及实验要求的不同，下文数据部分请咨询厂家。

第一部分破碎动物组织

1）样品：猪肌肉组织

2）仪器： Tissuelyser 多样品组织研磨机（品牌：上海净信）；

耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠

3）步骤：

a. 取***克左右肌肉组织样品，均匀地剪切成少量样品块，分别放入若干***毫升的研磨离心管中。

b. 每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠和***µL trizol，分别盖紧管盖后，置入 24 孔研磨适配器中，再将适配器固定在研磨机中。

c. 将 Tissuelyser 多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹，研磨***秒，启动研磨器。

d. 研磨完全停止后，拿出研磨离心管，旋开管盖，取出研磨好的肌肉组织样品。

4）结果：

研磨后的效果如图 1，猪肌肉组织成很细腻的泥浆状，研磨效果良好。

图1 猪肌肉研磨对比第二部分破碎植物组织

第二部分破碎植物组织

1）样品：水稻叶片

2）仪器： Tissuelyser 多样品组织研磨机（品牌：上海净信）；

耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠

3）步骤：

a. 取***克左右叶片组织样品，均匀地剪切成少量样品块，分别放入若干***毫升的研磨离心管中。

b. 每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠，分别盖紧管盖后，置入 24 孔研磨适配器中，再将适配器固定在研磨机中。

c. 将 Tissuelyser 多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹，研磨***秒，启动研磨器。

d. 研磨完全停止后，拿出研磨离心管，旋开管盖，取出研磨好的叶片组织样品。

4）结果：

研磨后的效果如图 2，叶片组织成很细腻的泥浆状，研磨效果良好。顺带附上研磨黄豆（坚硬的植物种子）的研磨对比图。

图 2 水稻叶片研磨对比

图 3 黄豆研磨对比

第三部分结合液氮使用研磨机

当样品死活无法破碎完全/样品傲娇要低温环境时，上海净信 Tissuelyser 多样品组织研磨机+液氮=问题轻松解决。以血管和植物叶片为例，具体操作方法如下：

血管：

取 0.1 克新鲜血管，用剪刀剪成若干小块，然后放入 2 毫升离心管中，加入 1 颗 6 mm 研磨钢珠，盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻 1 分钟左右或直到液氮不沸腾，然后放入机器处理 30 秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取缓冲液，可以进行接下来的后续提取，加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃ 以下。

叶片：

取 0.2 克植物叶片，清洁叶片表面后放入离心管中，加入 1 颗直径 5 mm 不锈钢研磨钢珠，盖上管盖。将整个试管和适配器放入液氮中冷冻 1 分钟左右或直到液氮不沸腾，然后取出放入研磨机器中机器处理 30 秒钟。

取出样品管可见叶片被破碎成绿色粉末，然后加入提取缓冲液，进行接下来的后续提取即可，加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃ 以下。

第四部分提取物分析图

后记

想入手这个神器，但又对研磨效果有所犹疑的小伙伴，现在上海净信部分研磨机产品可申请试用，是时候下手了。激动人心的还有，近期研磨机好价，试用爽了直接入手一台也是毫不含糊的。详情可致电 021-57790908 或 13761884588。

查看全部

实验方法

高通量破碎组织提取核酸或蛋白质

扫码关注「实验菌」，入科研社群，领学习资源

扫码关注「实验菌」，入科研社群，领学习资源

你可能喜欢