实验方法

做STAT3及pSTAT3的WB如何提蛋白?

2015-09-10 09:58

求助各位高手,RIPA裂解液提取的蛋白可以用于做STAT3的wb吗?还是需要专门提取核蛋白?
多谢!
顺便再问一句,stat3在胃癌细胞SGC7901中是否高表达?
RIPA裂解液可以做stat3的WB。不需要专门提取核蛋白!
一般来说,stat是转录因子,只有磷酸化的stat才有活性,它通过形成二聚体的形式进入细胞核内,和相关靶基因结合,启动靶基因转录,因此一般情况下是提取核蛋白,westblotting检测磷酸化的stat蛋白才有意义,而STAT总蛋白是没有变化的。当然要检测stat-DNA的结合活性,目前通常采用的方法是EMSA,或者CHIP。
谢谢二位!
CREB 提取也是这样吗

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来源:丁香园论坛

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