小弟一直在做NFkappaB与IkappaB，有几个问题一直搞不明白，查了一些文献也没查到什么内容
1 IkappaB磷酸化及泛素化之后，也就是降解了，NFkappaB就可以入核，也就是说IkappaB的量下降了，我用RT-PCR法可以检测到IkappaB相关的表达吗？可果用RT-PCR方法得出IkappaB的表达随时间增强，是不是意味着有更多的IkappB与NFkappaB结合？我用RT-PCR方法检测到的IkappaB是结合NFkappaB的IkappaB，还是游离的于胞浆中的，与NFkappaB分离的IkappaB呢？
2 关于有人提到呈查到过文献说“据查当IKBα被磷酸化后分解后，P65和P50才能解离激活。所以，当刺激开始的时候，磷酸化的IKBα下调。由于P65活化后又可以上调IKBα表达，所以，经过一定时间之后，IKBα恢复。从开始下降－最低点－开始增多－恢复，这是一个变化过程。”这这方面的文献提供一下给小弟吗？相关连接也可以！主要是NFkappaB与IkappaB之间的量的关系。谢谢！

我觉得还是用western来做比较好，直接看蛋白表达更确切。RT做出来的只是mRNA水平的表达，谁知道后来这些RNA是否都成了蛋白？可以做IP来检测蛋白之间的结合。

楼上所言极是