实验方法

【求助】请教一个关于microRNA问题

2015-10-10 10:41

遇到一个问题,请达人帮助解答一下,以解心中疑惑。如
有人已验证A基因在某种细胞是B微RNA的靶点,若在我的目的细胞系中,用B微RNA模拟或抑制物进行研究,并进一步检测A基因在mRNA及蛋白水平的改变,请问这是否有意义?因未见到这样的文献,故请教。
我认为miRNA对基因是多对一的作用模式,所以不一定有会有mRNA及蛋白水平的改变。如果你验证末改变,可能说明还有别的miRNA对这个mRNA有影响。好像有文献做这个在蛋白水平的改变的啊。
这个不仅涉及miRNA极其靶基因多对一的问题,还有miRNA表达的时空特异性。只能看你验证的结果了,不验证,谁也没有结论。
kunyushan wrote:
有人已验证A基因在某种细胞是B微RNA的靶点,若在我的目的细胞系中,用B微RNA模拟或抑制物进行研究,并进一步检测A基因在mRNA及蛋白水平的改变,请问这是否有意义?因未见到这样的文献,故请教。

关键在于你做个这个实验想要回答什么问题?如果说MicroRNA可以影响mRNA和protein的水平,那没有什么意义,研究的文章太多了;如果你想特定地证实MicroRNA B是在mRNA和/或protein水平改变target A,还是有点意义的,可能实验还是比较麻烦的,但起码你验证了特定的microRNA B对target A的抑制方式。如果这个target A本身非常重要,你还能做一些相关的验证,如围绕target A相关的pathway做工作的话意义就更大了。
不知道他是怎么验证的,是预测,还是实验证实?如果有人做了细胞,你可以做一下动物水平的miR过表达看看。
我觉得没多大意义。楼主的意思很明白:就是换个细胞模型 重新把别人的东西重复一遍,可能解决的问题还是差不多,所说明的效应都一样,我们知道mirna的作用方式是相当conserved,就是说别人在这个细胞上已经验证的东西换个细胞模肯定也会成立,所以我认为这样做没多大意思,顶多算是高水品重复。 仅供参考!!!
这种文章很多啊 怎么会看不到呐?通过大量的文献来掌握所研究领域的前沿十分必要啊
miR 和 mRNA的 in vitro 体外抑制作用在体内是不一定一致的。
如果别人没有在 in vivo 环境下真实观察到这一抑制现象,还是值得去研究的。
不同意SHIIHS的观点:我认为miRNA对基因是多对一的作用模式,所以不一定有会有mRNA及蛋白水平的改变

miRNA对靶mRNA的作用一般是一对多!!而不是多对一!
The number of confidently identified miRNA Target genes
110 in C. elegans,
140 in the fly Drosophila melanogaster,
400 in humans
来自CELL Cell 136, January 23, 2009
当然,不同的miRNA也可以作用于同一个mRNA,这类miRNA一般是来自一个CLUSTER-簇
miRNA对mRNA,蛋白质水平都有抑制作用,这篇文献里讲了,我有PPT,如果想要发信息给我
jiachengyou2007 wrote:
miRNA对靶mRNA的作用一般是一对多!!而不是多对一!
The number of confidently identified miRNA Target genes
110 in C. elegans,
140 in the fly Drosophila melanogaster,
400 in humans
来自CELL Cell 136, January 23, 2009
当然,不同的miRNA也可以作用于同一个mRNA,这类miRNA一般是来自一个CLUSTER-簇
miRNA对mRNA,蛋白质水平都有抑制作用,这篇文献里讲了,我有PPT,如果想要发信息给我


可否将原文附件发上来看看?很感兴趣
已经给你发过去了,请查收。附件最大只能300K,我还不很清楚怎么传一个比较大的附件。烦告之,我也注册过一个什么 硕网盘,但好像无法上去。
希望能看下你的资料 yihe723@126.com 谢谢

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