培养基因其营养物质丰富,极易染菌,给培养过程及后续试验带来困扰,目前,判断染菌的主要方法是培养检测,最后通过观察颜色变化给出结论,此过程历时较长,且打瓶过程中也伴随着染菌的风险。
若有一种快检方法,能即时给出结论,将对培养基质量控制(特别在染菌早期)带来很大益处。JIMBIO CC 流式库尔特计数仪,检测粒径范围广(3-30μm),能对菌团有良好的判断,30s 内快速给出检测数据。
1. 材料与方法
1.1 材料
1.1 材料
培养基:Hyclone MEM 未开封培养基、已开封久置培养基
1.2 检测
1.2 检测
用计数仪分别检测未开封和已开封久置的培养基,并将已开封久置培养基过 0.22μm 后再次检测。
2. 结果与分析
图 1. 未开封培养基计数
图 2. 已开封久置培养基计数
图 3. 已开封久置培养基过完滤膜后计数
从图 1、图 2 可看出,未开封培养基计数检测结果接近于 0(2 个颗粒信号为正常噪音产生),已开封久置培养基颗粒浓度已较高,绝大多数集中在 5μm 左右,此处需注意,单个细菌的粒径大小不足 1μm,因其会以菌团聚集,导致检测平均直径增大。
从图 3 看出,将已开封久置的培养基过完 0.22μm 的滤膜后,再次检测,无颗粒信号产生,验证之前的信号颗粒确由染菌引起。
大多数细胞的直径在 10-20μm 的区间内,如果使用 JIMBIO CC 流式库尔特计数仪在对细胞悬液计数过程中,5μm 处出现明显出峰,则很有可能是培养基染菌导致的。
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