woxingwosu wrote:
有几个问题需要确认一下：

1. 你做免疫共沉淀（IP）的抗体是否可以用。WEstern能识别的抗体不一定能用在IP。

2. 内源性蛋白的表达量。需要先确认一下这个蛋白的表达量，如果这个蛋白本来表达量就很低，那么做IP的难度就很大，这时候需要考虑过量表达这个蛋白了。或者需要收集大量的细胞来跑胶。

3. 银染的问题。我觉得你做IP首先要确认的是你的目的蛋白是否有被IP下来。最好用western检测一下IP沉淀中是否含有你要的内源性表达的蛋白，有的话再进一步做银染。银染的上样量可以大一些。当然我觉得可能你在IP的过程中出现问题的几率比较大。

祝好运。