实验方法

【共享】聚丙烯酰胺凝胶电泳新配方,短胶1bp分辨率

2015-07-30 09:46

与大家分享一种高分辨率聚丙烯酰胺凝胶的制备方法——Enhanced 聚丙烯酰胺凝胶(EP凝胶)
EP凝胶使用短胶板制备,一般10cm即可,制备后分辨率能达到1bp,并且核酸电泳条带比老方法制备的聚丙烯酰胺凝胶电泳条带更分散,更清晰。
9%-12%的聚丙烯酰胺凝胶能达到1bp分辨率,6%-8%的凝胶能达到4bp的分辨率。
Gel Conc.  DNA Range bp  Acrylamide-Bis, 40%, (29 : 1)  Deionized Water  TAE Buffer (20X)  EnhanceIT Polymer solution (10X)  TEMED  Ammonium Persulfate
12%  50-150  3.00 ml  5.5 ml  0.50 ml  1.00 ml  5 µl  50 µl
11%  60-200  2.75 ml  5.75 ml  0.50 ml  1.00 ml  5 µl  50 µl
10%  70-250  2.50 ml  6.00 ml  0.50 ml  1.00 ml  5 µl  50 µl
9%  90-300  2.25 ml  6.25 ml  0.50 ml  1.00 ml  5 µl  50 µl
8%  100-350  2.00 ml  6.50 ml  0.50 ml  1.00 ml  5 µl  50 µl
7%  120-400  1.75 ml  6.75 ml  0.50 ml  1.00 ml  5 µl  50 µl
6%  150-800  1.50 ml  7.00 ml  0.50 ml  1.00 ml  5 µl  50 µl

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来源:丁香园论坛

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