实验方法

钙质染色实验

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钙质沉积于骨组织或病理变化的组织中,多见于组织坏死、动脉粥样硬化和肿瘤等钙化的组织。在茜素的作用下,可与钙形成有色的螯合物(钙质)成分。


内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》


基本方案

实验原理

钙质即钙化物质,在各种组织中都可以形成钙质,这种钙盐沉积物也可被称为钙盐沉着,形态多样化,有的呈颗粒状和片块状等。其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。常用 Dahl-McGec-Russell 茜素红 S 法染色。

实验材料

石蜡组织切片

仪器/耗材

滴管

实验步骤

茜素红 S 染色液:茜素红 S 1 g,蒸馏水 90 ml,1% 氢氧化铵 10 ml。此液 pH 值应在 6.3 左右,此溶液至少可保存 1 个月。


乙酸液:乙酸 0.5 ml,蒸馏水 100 ml。


亮绿液:淡绿 0.2 g,蒸馏水 100 ml。


1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。


2. 茜素红 S 染色液染色 5 min。


3. 蒸馏水速洗 2 次。


4. 亮绿染色液染色 30 s。


5. 乙酸液速洗 2 次。


6. 无水乙醇快速脱水。


7. 二甲苯透明,中性树胶封固。

注意事项

1. 茜素红染色液不能存放时间较长,以免影响染色效果。


2. 染色作用后,无水乙醇脱水并及时用滤纸吸干,再进行透明和封固。

其他

结果:钙质物质呈红色,背景呈淡绿色。

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