实验方法

肥大细胞染色实验

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肥大细胞来源于未分化的间质细胞,分布于血管周围黏膜下、疏松结缔组织、肿瘤组织及过敏性疾病等组织中,易被异染性染料着色。


内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》


基本方案

实验原理

肥大细胞形态较大(20~30 μm),细胞核较小,细胞质内充满许多的圆形嗜碱性颗粒。由于颗粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也属于硫酸黏多糖类,能够被异染性染料着色,常用甲苯胺蓝染色法。

实验材料

石蜡组织切片

仪器/耗材

滴管

实验步骤

甲苯胺蓝染色液:甲苯胺蓝 0.5 g,蒸馏水 100 ml。


冰醋酸分化液:冰醋酸 0.5 ml,蒸馏水 100 ml。


1. 石蜡组织切片 4 μm,脱蜡至水。


2. 甲苯胺蓝染色液染色 10 min,蒸馏水洗 2 次。


3. 冰醋酸分化液 30 s 左右,至颗粒清晰为止(显微镜控制)。


4. 蒸馏水洗 2 次,无水乙醇快速脱水。


5. 过滤纸吸干,二甲苯透明和中性树胶封固。

注意事项

1. 甲苯胺蓝液着色力较强,根据不同的组织,可适当缩短染色时间。


2. 冰醋酸分化液作用后,必要时用显微镜的高倍镜进行观察。

其他

结果:肥大细胞颗粒呈紫红色,细胞核呈蓝色。

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