实验方法

脲酶的测定实验

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脲+H2O+2 H→CO2+2NH4


含金属锌的酶。释放的 NH3 可以通过 pH 稳定计的辅助进行确定,也可以通过与谷氨酸脱氢酶相偶联的分光光度计法测定。


《酶学实验手册》

pH 稳定计法

实验原理

实验材料

脲酶

试剂/试剂盒

HCl

仪器/耗材

pH 稳定计

实验步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


9 ml 0.2 mol/L 脲


0.2 ml 脲酶


自动滴定管充满 0.1 mol/L HCl,通过 pH 稳定计使得 pH 保持在 6.1,大约每 10 min 记录一次通过自动滴定管每次滴定的体积。

注意事项

其他

试剂:


0.2 mol/L 脲(Mr=60.0;1.2 g 溶于 100 ml H2O 中,调节至 pH 6.1)


0.1 mol/L HCl,标准溶液


脲酶(1 mg/ml)

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