实验方法

α-葡糖苷的测定实验

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α-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶,麦芽糖酶。


从末端切断 α-D-葡萄糖的非还原的 1,4 键相连的 α-D-葡萄糖残基。对于实验,麦芽糖分成两个葡萄糖,这是从己糖激酶的反应中测得的,而己糖激酶(HK)的反应又与葡萄糖 6-磷酸脱氢酶(G6PDH)相偶联。


来源:《酶学实验手册》

测定 α-葡糖苷酶

实验原理

实验材料

α-葡糖苷酶

试剂/试剂盒

乙酸缓冲液 麦芽糖溶液

仪器/耗材

分光光度计

实验步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


实验混合物:


0.01 ml 酶样品

25℃时,培养 5 min,将反应试管移入水浴中或加热箱中来停止反应。取 0.1 ml 等分试样检验葡萄糖。

注意事项

其他

试剂:


0.1 mol/L 乙酸缓冲液 pH 6.0,包含 1.5 mmol/L EDTA[5.7 ml 乙酸,100%,Mr=60,溶于800 ml H2O,加入 560 mg EDTA·Na2·2H2O(Mr=372.2),用 1mol/L NaOH 调至 pH 6.0,补充至 1 L ]


0.5 mol/L 麦芽糖溶液(一水合物,Mr=360,8 g 溶于 100 ml 水中)

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