基本方案
实验原理
直接测量己糖激酶的反应：
D-葡萄糖＋ATP → 6-磷酸葡萄糖＋ADP
简单的光度测量是达不到的，葡萄糖的磷酸化最好用测量磷酸或者 ATP32 标记的办法。由于通过层析，G6P 的实验必须完全与 ATP 和 ADP 分开，因此，建议应用 HPLC 方法。酶的实验通常是酶与 G6P 脱氢酶反应偶联:
D-6-葡萄糖＋ATP＋NADP＋ → 6-磷酸葡萄糖＋ADP＋NADPH＋H＋
这些反应都已经通过光度测量实现。当使用这个偶联的系统，首先应该单独进行 G6P 反应实验，然后在己糖激酶的存在下用葡萄糖和 ATP 取代 G6P 继续反应。
实验材料
试剂/试剂盒
仪器/耗材
实验步骤
0.98 ml 实验混合物
0.02 ml 酶样品
25℃ 时，于 340 nm 处吸收值升高，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。
注意事项
其他
试剂：
100 mmol/L 三乙醇胺-HCl/NaOH，pH 7.6（三乙醇胺-HCl，用 1 mol/L NaOH 调节）
1.0 mol/L D-葡萄糖（Mr＝180.2；18 g/100 ml）
0.1 mol/L ATP（二钠盐，三水合物，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水）
0.1 mol/L MgCl2（六水合物，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）
0.01 mol/L NADP（二钠盐，Mr＝787.4；79 mg 溶于 10 ml 水中）
6-磷酸葡萄糖脱氢酶（商业品有 100～500 U/mg，准备时稀释至大约 5U/0.1 ml）
