实验方法

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定实验

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基本方案

实验原理

D-6-磷酸葡萄糖:NADP 氧化还原酶,G6P-DH,Zwischenferment (O.Warburg)。


6-磷酸葡萄糖 + NADP+ → 6-磷酸葡萄糖酸盐 + NADPH + H+

仪器/耗材

分光光度计

实验步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


0.98 ml 实验混合物


0.02 ml 酶溶液


25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。

注意事项

其他

试剂:


0.1 mol/l 三乙醇胺-NaOH,pH 7.6(三乙醇胺-HCl,Mr=185.7;18.6 g 用 1 mol/l NaOH 调节)


0.1 mol/l D-6-磷酸葡萄糖(钠盐,Mr=282.1;282 mg 溶于10 ml 水中)


0.04 mol/l NADP(二钠盐,Mr=787.4,315 mg 溶于 10 ml 水中)

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