实验方法

动物血液采集实验

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很多免疫学实验研究均需采集动物的血液,例如抗体主要存在于血淸内,所以在动物体内制备抗体均需采集免疫后的动物血液;又如豚鼠血清内含补体量较多,所以需要补体时常采集豚鼠 血液分离血清,其他如各免疫细胞功能测定等研究也常采血分离免疫细胞。因此,采集动物血液的操作也是免疫学最基本的实验技术之一。


采集血液的部位视动物的种类、取血的多少以及是否需要保留动物而定。例如:1. 采集家兔血液有耳静脉采血法、耳动脉放血法、心脏采血法以及颈动脉放血法。耳静脉采血法一般适用于只需少量血液时,常用于免疫注射后先采少量血,测其效价,看其是否达到标准。颈动脉放血可得到最大量的血液,但不能保留动物,若要保留动物而又要较大量的血液可自耳动脉和心脏采取,一般使用后者居多。需要保留动物时,在采血较多后必须注射生理盐水或葡萄糖注射液以补充其所失去的水分。2. 豚鼠可采心血和眼眶内血。3. 小鼠一般从眼眶内采血。

来源:《微生物学实验(第三版)》

小鼠眼眶后血管丛取血法

实验原理


实验材料

小鼠

实验步骤

1. 右手拖鼠尾,左手的食指放在小鼠左耳后面,拇指放在右耳上,然后两手指抓住此两处的皮肤,并使小鼠的头向左转,而右眼朝上,此时由於颈静脉堵塞而使眼眶内血管丛充血,眼睛是突出的。


2. 右手用一毛细吸管轻轻从小鼠右眼的边缘当中插入眼眶内(如图 1)的眼球下面,以吸管插入的方向为中心旋转吸管,因而切入血管丛,感觉到血管壁被刺破,但血液不会立刻流出。


图 1 小鼠眼眶后血管取血液毛细吸管插入位置


3. 刺破管壁后,将毛细管向外收回少许(约 1 mm),血液会流入吸管。假若不见血液,检査小鼠颈部是否正确地扭转,然后重复以上操作。


血压正在进入吸管时,吸管不要移动。


4. 当血液停止流入吸管时,再移动吸管,向内和向外移动约 1 mm,并轻轻转动吸管,看血液液面是否有所上升,若液面不再上升,即血液不再进入吸管时,则拔出吸管,同时立刻放松小鼠,其血液流动恢复正常,并不再出血。


5. 挤压吸管的橡皮滴头,将血液排入灭菌试管内。


6. 立刻将空吸管浸入盛有自来水的烧杯内,这样沾在管壁上的血液即被溶解而便于清洗和下次再用。

应用此法可采集到 0.4~0.6 ml血液,每次间隔至少 1~2 周。此法也适用于大鼠和豚鼠。

注意事项

其他

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