实验方法

糖发酵实验

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糖发酵试验是最常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要。


来源:《微生物学实验(第三版)》

基本方案

实验原理

绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类的能力上有很大的差异,有些细菌能分解某种糖并产酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢、甲烷、二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。发酵培养基含有蛋白胨,指示剂(溴甲酚紫),倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色(pH 6.8)变为黄色(pH 5.2)。气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明,如图 1。


图 1 糖发酵试验
A. 培养前的情况;
B.培养后产酸不产气;
C.培养后产酸产气。


仪器/耗材

试管架 接种环

实验步骤

1. 用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。


2. 取葡萄糖发酵培养基试管 3 支,分别接入大肠杆菌,普通变形杆菌,第 3 支不接种,作为对照。另取乳糖发酵培养基试管 3 支,同样分别接入大肠杆菌,普通变形杆菌,第 3 支不接种,作为对照。


3. 在接种过和作为对照的 6 支试管均置 37 ℃ 培养 24~48 h。


4. 观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡

注意事项

其他

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