(a)用PBSA洗三遍，充分清洁牙齿表面。

(b)用消毒液消毒，然后再用PBSA充分清洗。

(c〕用连接牙科钻的牙科碳化转头，沿骨质和釉质的结合处切开牙齿，然后暴露髓腔。间歇地将牙齿在用冰预冷的PBSA.中浸泡避免切割过程中过热。在SHED分离时，有时由于牙根吸收牙髓已经暴露了，就不需要进杆这个步骤。

(d)用小号精细镊或牙挖器，轻轻从牙髓腔中分离牙髓组织。

(e)将牙髓组织放人培养皿中的少量MSC培养液中。.注意不要使组织变干。