(a)准备冻存液：90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却，至少30min。

(b)CB-MNCs细胞计数。

(c)用冷的冻存液重悬细胞，调整细胞浓度为（5〜l0) ×10⁶活细胞/mL。

(d)按1mL/冻存管分装。

(e)立即将冻存管放入慢速冷冻盒，置于-70℃冰箱4〜24h。或者将冻存管放入液氮的控速降温仪中。

(f)4〜24h后，将置于-70℃冰箱或控速降温仪中的冻存管放入耐液氮储存盒，将此盒放入液氮罐的气相（大约-135℃)或液相（大约-196℃）中。