利用模块装配方法构建 ZFN
实验原理
利用模块装配方法构建 ZFN
材料
试剂
琼脂糖凝胶（2.5%)
牛小肠碱性磷酸酯酶
d N T P (每种10 mmol/L )
转化用大肠杆菌
MgCl2 (50mmol/L )
质粒： pBluescript (p B S --Z F ) 和 p c D N A 6 (Invitrogen)
P C R 片段纯化试剂盒
10 X 聚合酶缓冲液
限制性内切核酸酶： A p a l 、 B a m H I 和 SpeI
T 7 引物
T a g 聚合酶
Zif-ZFN D N A 模板
仪器
37℃加热块或者水浴
按预期的扩增程序工作的循环变温加热器
实验步骤
利用模块装配方法构建 ZFN
材料
试剂
琼脂糖凝胶（2.5%)
牛小肠碱性磷酸酯酶
d N T P (每种10 mmol/L )
转化用大肠杆菌
MgCl2 (50mmol/L )
质粒： pBluescript (p B S --Z F ) 和 p c D N A 6 (Invitrogen)
P C R 片段纯化试剂盒
10 X 聚合酶缓冲液
限制性内切核酸酶： A p a l 、 B a m H I 和 SpeI
T 7 引物
T a g 聚合酶
Zif-ZFN D N A 模板
仪器
37℃加热块或者水浴
按预期的扩增程序工作的循环变温加热器
