运用间期核荧光原位杂交对常见非整倍体的产前诊断实验_实验⽅法

实验原理

产前诊断是非常有效的工具。然而，临床医生应经过培训、患者应仔细咨询了解用FISH 进行常规产前细胞遗传学分析的优势和局限性。应该强调实验不能发现结构染色体异常、嵌合体或 13、 18、 21、 X 和 Y 之外的染色体数量异常 6 这些局限性也应该在FISH 结果的最终报告中详细注明。 3 . 本实验要求好的实验室经验和强制性学习曲线。在该技术用作临床工具之前，建议在细胞遗传学实验室中进行实验至少50〜100个病例。实验过程中得到的 FISH 结果与作为内对照的标准细胞遗传学分析结果相比较。实验只用作学习目的，不报告给临床医生和患者。 4.. ProbeCheck™ 阳性对照和阴性对照标本包括在AneuVysion™ 试剂盒中。正常男性和嵌合体羊水细胞分别作为阴性对照和阳性对照。这些对照标本可用来进行质量控制和培训技术人员对间期细胞F IS H 的结果判断。 5 . 对成功的FISH 杂交结果观察失败可能是荧光显微镜故障或状态不理想，或错误的滤光片选择造成的。应进行常规的显微镜清洁，定期由技术代表进行检查。激发光源应该正确安装，它的使用时间应该记录，使用寿命大约为 200h 。物镜根据放大倍数决定使用或不使用镜油。使用的镜油应该无自发荧光、专门用于荧光显微镜。建议使用适合AneuVysion™ 试剂盒的多带通和单带通荧光显微镜滤光片。 Vysis公司备有适于各种显微镜的滤光片。用浅蓝绿色、绿色和橘黄色荧光标记CEP-18/X/Y 和 LSI-13/21探针杂交的染色体可以用Aqua、 Green 或 Orange的单通道滤光片观察，也可以用 DAPI/Green/Orange三通道滤光块阅片。 SpectrumAqua信号呈现浅绿蓝色， SpectrumOrange信号呈现粉橘黄色， SpectnimGreen信号呈现绿黄色。其他 DNA用 DAPI染成蓝色。 6 . 建议用校准的温度计测量溶液、水浴锅和培养箱的温度，因为这些温度对结果非常重要。" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2016/08/B1470650360018ju9ncxbd68png_small.jpg" style="width: 492px; height: 712px;" />