实验方法

用于小鼠胚胎内高效基因 转递的子宫内微电穿孔技术

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借助 一 种 鸡 胚 电 穿 孔 的 新 技 术 ，成 功 地 将 基 因 导 入 到 胚 胎 中 。与 之 相
反 ，由 于 哺 乳 动 物 的 胚 胎 被 母 体 的 子 宫 包 围 ，在 发 育 的 大 多 数 阶 段 ，用 传 统 的 办 法 在 宫内 特 定 区 域 对 哺 乳 动 物 胚 胎 的 遗 传 操 纵 变 得 十 分 困 难 ，甚 至 根 本 不 可 能 。针 对 这 一 难点 ，我 们 开 发 了 子 宫 内 微 电 穿 孔 技 术 ，该 技 术 利 用 置 人 到 小 鼠 胚 胎 脑 室 的 精 细 钨 丝 和 铂丝 将 D N A 导 人 到 小 鼠 胚 胎 中 。虽 然 基 因 异 位 表 达 仅 持 续 几 天 时 间 ，但 从 胚 胎 期 到 成 熟后 ，均 能 检 测 到 这 种 暂 时 性 影 响 大 脑 发 育 的 效 应 。
作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」

子宫内小鼠胚胎的电穿孔

实验原理

子宫内小鼠胚胎的电穿孔

材料

试剂
待 导 入 的 D N A , 溶 液（l ug /ul)

乙 醇（5 0 % )

固绿 F C F 蛋白质染色试剂（Sigm a-A ld rich )

磷 酸 盐 缓 冲 液（P B S )

怀 孕 小 鼠（E 10. 5 或 者 怀 孕 期 更 长）

戊巴比妥钠

仪器

不锈钢制小手术夹



 

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实验步骤

子宫内小鼠胚胎的电穿孔

材料

试剂
待 导 入 的 D N A , 溶 液（l ug /ul)

乙 醇（5 0 % )

固绿 F C F 蛋白质染色试剂（Sigm a-A ld rich )

磷 酸 盐 缓 冲 液（P B S )

怀 孕 小 鼠（E 10. 5 或 者 怀 孕 期 更 长）

戊巴比妥钠

仪器

不锈钢制小手术夹



 

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