实验方法

多肽的固相合成、切割及纯化

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固相肽合成技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学和基因工程研究具有重大影响和重要意义的技术。它的基本过程为:1、偶联保护氨基,即将第一个保护氨基以共价键偶联外固相载体上(在合成过程中始终不能脱落)。2、脱保护,在侧键基团保持稳定条件下脱去氨基上的保护,暴露出自由氨基,例如脱去Fmoc。3、偶联,将下一个已活化的氨基酸与结合于固相的前一个氨基酸缩合形成肽键。4、肽键延长,反复进行脱保护与偶联两步使肽键延长到设计长度。5、切割,将合成的肽由固相载体上切割下来并脱去侧链保护。6、纯化,切割后的肽进行纯化、鉴定。

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