实验方法

盘基网柄菌培养物的发育和储存实验

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本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。

琼脂平板上的同步发育

实验原理

1. 准备饥饿培养基试剂。

2. 收集 2X108 的盘基网柄菌细胞,100 g 离心 5 分钟。用 100 ml 饥饿缓冲液洗一遍,再重悬于 10 ml 该缓冲液中。

3. 加 9 ml 细胞悬液到饥饿平板上,均匀涂布,使细胞吸附 30 分钟。

4. 很慢且小心地将尽可能多的剩余缓冲液吸走,而不吸走细胞。敞开盖子干燥 30 分钟,盖上盖子置于暗处 22℃。

5. 在所需要的时间加 10 ml 饥饿缓冲液至培养皿中,用橡胶刮棒或玻璃棒悬浮细胞,将细胞悬液转移到一个离心管中,100 g 离心 5 分钟,按使用着的方法继续操作。

实验材料

盘基网柄菌细胞

试剂/试剂盒

饥饿缓冲液

仪器/耗材

饥饿培养基

实验步骤

1. 准备饥饿培养基试剂。

2. 收集 2X108 的盘基网柄菌细胞,100 g 离心 5 分钟。用 100 ml 饥饿缓冲液洗一遍,再重悬于 10 ml 该缓冲液中。

3. 加 9 ml 细胞悬液到饥饿平板上,均匀涂布,使细胞吸附 30 分钟。

4. 很慢且小心地将尽可能多的剩余缓冲液吸走,而不吸走细胞。敞开盖子干燥 30 分钟,盖上盖子置于暗处 22℃。

5. 在所需要的时间加 10 ml 饥饿缓冲液至培养皿中,用橡胶刮棒或玻璃棒悬浮细胞,将细胞悬液转移到一个离心管中,100 g 离心 5 分钟,按使用着的方法继续操作。

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