Caspase激活的比色计定量
实验原理
实验材料
仪器/耗材
实验步骤
2. 在冰上孵育细胞 30 分钟。
3. 用 Eppendorf 将样品在 13000 r/min 离心 5 分钟,取上样进行 Caspase 活性测定:每种样品留一等份作蛋白质定量。
4. 在水或 DMSO 中溶解底物,配置成 20 mmol/L 的储存液,可在 -20℃ 避光保存。
5. 将反应混合液置微量滴定板中,用带动力学装置的 SpectraMax 微量滴定板分析仪在 405 nm 滤光片下读取反应数据。每 2~20 秒检测样品,确定底物的初始水解率;保证所得底物水解率为线性。