实验方法

新鲜实体组织样本的制备(机械法)

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机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。本实验来源「实用流式细胞术彩色图谱」 王书奎、周振英主编。

剪碎法

实验原理

机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。

实验材料

组织

试剂/试剂盒

生理盐水

仪器/耗材

剪刀 尼龙网

实验步骤

1. 将组织块放入平皿中,加入少量生理盐水。

2. 用剪刀将组织剪至匀浆状。

3. 加入 10 ml 生理盐水。

4. 用吸管吸取组织匀浆,先以 100 目尼龙网过滤到试管中。

5. 离心沉淀 1000 r/min,4~5 min,再用生理盐水洗 3 遍,每次以低速(500~800 min)短时离心沉淀去除细胞碎片。

6. 以 300 目尼龙网滤去细胞团块。

7. 细胞用固定液固定或低温保存备用。

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