新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验原理
实验步骤
2. 将选好的酶溶掖 1~2 ml 加入盛有被消化组织的试管中。
3. 一般消化 20~30 min ( 恒温 37℃ 或室温),消化期间要间断振荡或吹打。
4. 终止消化,收集细胞悬液,以 300 日尼龙网过滤,除去细胞团块,以低速离心除去细胞部片。
5. 将制备好的单细胞悬液进行荧光染色后上机检测,或保存备用。
注意事项
2. 要注意酶的使用浓度和消化时间。
3. 要注意酶活性的 pH 值,胃蛋白酶在碱性环境中会失去活性,而胰蛋白酶在中性溶剂中活性不佳。
4. 要随时注意影响酶活性的其他因素,如酶的生产批号等。