酶联免疫法没有放射性，并且在显色机理和方法的选择上比较灵活（目前见于报道的有 ELISA 法）。但由于酶法建立在光度法基础上，受显色剂有限的吸光度和动力学范围的限制，故灵敏度不高。因此 Rossi-R 等在检测中以单克隆抗体代替以往的多克隆抗体，使酶联免疫法的灵敏度得到进一步的提高，对体液中 EPO 含量的检测达到了 10-11M的灵敏度（与放免法相当）。

荧光免疫检测（FIA）是非放射免疫法中灵敏度最高的，它常用来检测含量很低的生物活性物质。近年来利用特殊的荧光探针，建立有效的 FIA 法对 EPO 进行检测也成为众多学者关注的点，如从螺旋藻中提取藻胆蛋白作为荧光探针等。

此外化学放光免疫分析（CLIA）是另一个较为活跃的研究领域，它具有灵敏度高、本底低的特点。且 CLIA 的灵敏度一般均高于酶免疫分析法。目前已有利用 CLIA 原理制成了试剂盒出售

1.EPO 在体液中含量低。正常人体液中 EPO 的含量仅为每毫升纳克级，血液中为130-230ng/mL。

2.EPO 与 rhEPO 结构相似。两者具有完全相同的氨基酸序列，仅 N 端所接的糖基略有差别。

3.EPO 在血液中的半衰期短。一般报道静注为５-６小时。

4.个体之间及个体本身的 EPO 浓度差异很大。