1. 芯片的制作

十字通道玻璃芯片制备。分离通道总长45 mm(有效长度38 mm)，进样通道总长10 mm，通道顶宽50 μm，深15 μm。

2. 尿样预处理　

取5 mL尿样于20 mL离心管，加入2 mL乙醚和1 g无水Na₂SO₄，振荡5 min后离心分离。移取上层有机相于2 mL离心管，用N₂吹干，加100 μL水溶解残留物。

3. 待测物的衍生　

移取EP和PEP混合标准溶液(或上述溶液)100μL于2 mL的离心管，加入100μL 100 mmol/L硼砂缓冲液(pH8.4)，25 mmol/L NBD-Cl溶液200 μL，用水稀释至1 mL后，50℃水浴中温浴30 min。

4.分离测定　

十字通道依次用0.1 mol/L NaOH、水、运行缓冲溶液各冲洗20、10、20 min。在芯片的试样废液池、缓冲液池、缓冲液废液池中加入运行缓冲液,并使通道内充满运行缓冲液;在试样液池中加入试样溶液,使激光束聚焦于芯片分离通道下游离十字交叉口38 mm处。按下列程序分别向4个储液池施加电压,进行进样和分离操作：进样30 s，试样液池、试样废液池、缓冲液池、缓冲液分别施加1000、0、830、1000 V；分离120 s，试样液池、试样废液池、缓冲液池分别施加2170、2170、2600和0 V电压。

1. 注意夹流电压的选择。

2. 不同SDS浓度对分离影响不同。

3. 选择合适的pH、分离电压。