绿色荧光蛋白融合技术
实验原理
实验材料
实验步骤
2. 纯化融合蛋白,经SDS-PAGE分析为单一条带,分子量36KD。
3. Western印迹与ELISA,验证融合蛋白能特异性地与IGF-1抗体反应,具有IGF-1的抗原性。
4. 表面等离子体共振(SPR)分析,得到GFP-IGF与IGF-1单抗的KD=2.6X10-8M,符合免疫的要求。
5. CD光谱、荧光光谱、荧光寿命分析表明融合蛋白保持了GFP的荧光特性。
注意事项
1. 注意分子操作的规范。
2. 蛋白纯化应在低温进行。