高效液相色谱-串联质谱法
实验原理
实验材料
实验步骤
1. 取样: 称取约500 g动物肌肉、肝脏,完全切碎后,匀浆备用;取10枚鲜蛋,去壳,均质备用;取鲜牛奶500 mL,混匀备用。
2. 提取:试样5 g,置于50 mL离心管中,加入10 %碳酸钠溶液3 mL和10 mL乙酸乙酯,均质30 s,振荡10 min(4℃),6000 r/min离心10 min,将上层有机相转移至梨形瓶中。再用10 mL乙酸乙酯重复提取一次,合并上层有机相。在40℃下,旋转蒸发至干。用50 %乙腈水溶液1 mL溶解残余物,溶液冷冻30 min,16000 r/min离心5 min,取适量溶液经0.22μm滤膜过后,供LC/MS/MS法测定。
3. 进样分析
注意事项
2. LC-MS接口避免进入不挥发的缓冲液,避免含磷和氯的缓冲液,含哪和钾的成分必须<1mmol/1,盐分太高会抑制离子源的信号和堵塞喷雾针及污染仪器。
3. 选择合适的电压:当DP电压(去簇电压)高时,样品在源内分解或碎裂,也会使得多电荷离子比例低,多聚体也减少。
其他
2. 正、负离子模式的选择:一般原则为正离子适合碱性样品,可用于乙酸或甲酸对样品加以酸化,样品中含有仲氨或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。负离子适合酸性样品,可用氨水对样品进行碱化。
3.来源于《药物色谱分析》丁黎主编。