聚丙烯酰胺凝胶中DNA的放射自显影检测
实验原理
试剂/试剂盒
仪器/耗材
实验步骤
1. 缓冲液和溶液
乙酸
2. 凝胶
聚丙烯酰胺凝胶
3. 专用设备
市售凝胶干燥机（可选或不选）
塑料筛（筛目大小为 1 cm，园艺和五金商店有售）（可选或不选)
放射性墨水或化学发光标准参照物
Whatman 3 MM 滤纸
二、方法
1. 将凝胶及其附着的玻璃板于 7% 乙酸中浸 5 min。小心地从固定液中拿起玻璃板以取出凝胶。
2. 去离子水短暂漂洗凝胶，用一叠 Kimwipes 纸蘸去凝胶表面多余的液体。
3. (可做或不做）将凝胶放在 Whatman 3 MM 纸上，用市售凝胶干燥机干燥。
4. 将凝胶及支撑的玻璃板包在 Saran Wrap 膜中，用梳子宽的一端或折叠的 Kimwipe 纸除去 Saran Wrap 膜中的气泡或皱褶。
5. 将放射性墨水或化学发光标准参照物标记的黏性小标签贴于 Saran Wmp 膜表面，以便对准凝胶与胶片的位置。用透明胶带覆盖放射性墨水标签，以免污染胶片盒和增感屏。
6. 将凝胶倒置，按以下步骤对 X 射线片（如 Kodak XAR-5 或同类产品）曝光：
(1) 在暗室里，用胶带将密封的凝胶与裁成玻璃板大小的一张 X 射线片粘在一起。
(2) 用不透光的铝箔将凝胶与胶片包好。
(3) 于室温或 -70℃ 曝光合适的时间，增感屏使用与否均可。
(4) 按制造商的建议显影、定影和干燥 X 射线胶片。
