实验方法

免疫电泳实验

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免疫电泳(immunoelectrophoresis) 技术是基于抗原的电泳迁移以及与抗体的专一性免疫亲和或沉淀反应来鉴定其强度和特异性。在大部分电泳中,样品中的抗原通过含有相应抗体的 pH 8.6 的薄层琼脂糖凝胶,抗原在 pH 8.6 时通常带强负电,与在含有抗体的凝胶中电泳时发生免疫反应。本实验来源「蛋白质电泳实验技术」主编:郭尧君。

溶液的准备

实验原理

实验步骤

1. Tris-巴比妥缓冲液贮液

2.24 g 二乙基巴比妥酸,4.43 g Tris,0.053 g 乳酸钙,0.065 g 叠氮钠,用双蒸水溶解后,在容量瓶中定容至 100 ml。

2. 电极缓冲液

用双蒸水稀释 4 倍。

3. 1% 琼脂糖溶液

选择合适电内渗的琼脂糖,为避免它水化时成团,常将琼脂糖粉撒在上述配制的缓冲液上,煮沸溶解,在 90℃ 水浴上加热,搅拌,直至溶液转为透明。琼脂糖溶液可在 4℃ 贮存几个月,使用前再在 90℃ 水浴上加热溶解。

如果在凝胶溶液中需加抗体,必须在凝胶溶液被冷至 55℃ 后再加,随后立即灌注。

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