实验方法

细菌平板划线分离培养法实验

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本法适于混有多种细菌的临床标本或其他培养物,经过划线分离和培养得到单个菌落,供细菌计数和纯培养。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导

细菌平板划线分离培养法实验

实验原理

(1)曲线划线分离法:

此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。

(2)分区划线分离法:

此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的 1/4 处,接种是用连续区域划线法,每划 1/4 转动平皿 90°。每完成 1/4 划线后,接种环都要通过火焰灭菌,此法通过区域划线充分的稀释了培养物,以便最后获得较多的单个菌落。

(3)半定量计数法:

本法是供尿液半定量细菌计数用,取未经沉淀的尿液 0.01 ml 或 0.001 ml 于定量的接种环上,在琼脂平皿中心划一条线,在初次划线的基础上成直角均匀的连续划线涂布培养物,然后使平皿转动 90°再划线,使接种物完全覆盖于琼脂表面。

实验步骤

(1)曲线划线分离法:

此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。

(2)分区划线分离法:

此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的 1/4 处,接种是用连续区域划线法,每划 1/4 转动平皿 90°。每完成 1/4 划线后,接种环都要通过火焰灭菌,此法通过区域划线充分的稀释了培养物,以便最后获得较多的单个菌落。

(3)半定量计数法:

本法是供尿液半定量细菌计数用,取未经沉淀的尿液 0.01 ml 或 0.001 ml 于定量的接种环上,在琼脂平皿中心划一条线,在初次划线的基础上成直角均匀的连续划线涂布培养物,然后使平皿转动 90°再划线,使接种物完全覆盖于琼脂表面。

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