实验方法

抗酸染色配置以及染色方法实验

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抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导

抗酸染色配置以及染色方法实验

实验原理

抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。

实验步骤

碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)

一、实验试剂:

1. 萋纳石炭酸复红溶液:

碱性复红乙醇饱和溶液:10ml

5%石炭酸溶液:       90ml

2. 脱色剂:

浓盐酸:3ml 95%乙醇:97ml

3. 复染液(吕弗勒美兰液):

美兰乙醇饱和溶液:    30ml

10%氢氧化钾:       0.1ml

蒸馏水:             100ml

二、染色方法:

l. 涂片经火焰固定,加石碳酸复红溶液,徐徐加热至有蒸汽出现,切不可沸腾。染5min,水洗。

2. 加脱色剂,不时摇动玻片至无红色脱落为止,水洗。

3. 加复染液,染0.5-Imin,水洗。

4. 干后镜检,分枝杆菌呈红色,背景为兰色。

石炭团品红-硫酸美兰染色法

染液:

第一液:石碳酸品红溶液:取碱性品红乙醇饱和液10ml加5%石碳酸水溶液90ml混合。

第二液:硫酸美兰液:美兰2g,溶于75ml水中,慢慢滴加浓硫酸25ml混合即成。

方法:涂片经火焰固定后,滴加第一液微热染3min,水洗。再用第二液染约lmin,水洗。干后镜检。

结果:抗酸菌呈红色,其他皆为兰色。

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